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高床保育舍空氣微生物檢測簡易方法

發布日期：2016-10-11點擊次數：1794

高床保育舍/仔豬舍由于空間電場凈化微生物氣溶膠的特殊性（空氣微生物荷電后做趨向培養皿的定向移動）故不能采用常規的落菌檢測方法，故在此處推薦采用以下簡易定量測定法。如有條件，則可以采用空氣微生物采樣器進行采樣測定。

實驗分析：本實驗采用簡易定量測定法，用無菌注射器定量抽取空氣，將所取空氣壓入培養基內部，經培養后，即可定量、定性測定空氣中細菌、真菌等微生物，此法簡單易行。

采樣點：設豬床下方15cm為采樣區域，各點每天分別選在8：00、11：00、15：00、20：00、22：00進行，連續2-3天，按照“田”字形進行樣品的采集，菌落數取平均值。

實驗一、細菌總量的測定

1、實驗儀器：無菌注射器、無菌培養皿、溫濕度培養箱。

2、實驗試劑：營養瓊脂培養基。

3、實驗步驟：

（1）按比例配制培養細菌用的營養瓊脂培養基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。

（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環境空氣20~100ml。

（3）在無菌操作下，取已融化培養基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養基深處，緩慢將空氣壓入培養基內，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養基凝固，置于30℃恒溫箱中培養3d后統計細菌菌落數量，推算1L空氣所含細菌量。。

4、環境因素測定：采樣同時記錄豬舍內外相對溫度和濕度。

5、實驗結果：

計數菌落形成單位數（CFU），空氣中微生物濃度按奧梅梁斯基氏法計算。

微生物密度測定記錄：將計算結果填入表。

6、按平均值繪制日變化曲線。

7、對照舍重復以上步驟。

實驗二、真菌總量的測定

1、實驗儀器：無菌注射器、無菌培養皿、溫濕度培養箱。

2、實驗試劑：PDA培養基。

3、實驗步驟：

（1）配制培養真菌用的PDA培養基，滅菌后融化，在50℃水浴中保溫備用。

（2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環境空氣20~100ml。

（3）在無菌操作下，取已融化培養基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養基深處，緩慢將空氣壓入培養基內，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養基凝固，置于30℃恒溫箱中培養5d后統計真菌菌落數量，推算1L空氣所含真菌量。統計霉菌數量時培養的時間稍許延長。應用此法需多做平行試驗，求其平均值以提高性。

4、環境因素測定：采樣同時記錄豬舍內外相對溫度和濕度。

5、實驗結果：

計數菌落形成單位數（CFU），空氣中微生物濃度按奧梅梁斯基氏法計算。

微生物密度測定記錄：將計算結果填入表

6、按平均值繪制日變化曲線。

7、對照舍重復以上步驟。

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